多巴胺及多巴胺受体D1水平升高促进人肝细胞癌生长

摘要

背景与目的多巴胺及多巴胺受体D1(dopamine receptor D1,DRD1)是多巴胺受体家族成员之一,在癌症进展中发挥了重要作用,但多巴胺在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的分泌水平及DRD1对HCC的影响目前尚不清楚。本研究探讨了多巴胺系统对HCC的作用,研究了DRD1与HCC患者预后的相关性。方法采用酶联免疫分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测多巴胺代谢系统。采用微阵列分析、免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)及实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测DRD1的表达。构建了DRD1稳定敲除和过表达的细胞系。采用Transwell、克隆形成实验和细胞计数试剂盒8(Cell Counting Kit 8,CCK8)法检测癌细胞的恶性表型。Western blot检测cAMP/PI3K/AKT/cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element-binding,CREB)信号通路。有研究证实了这一信号通路在纹状体神经元中被DRD1激活并参与了肿瘤进展。建立HCC异种移植瘤用于体内实验。结果多巴胺脱羧酶(dopa decarboxylase,DDC)水平升高及单胺氧化酶A(monoamine oxidase A,MAOA)水平下降引起多巴胺代谢失衡,导致HCC局部多巴胺分泌增加。多巴胺促进了HCC细胞的增殖和转移。在HCC组织中DRD1表达水平升高,DRD1表达阳性与HCC患者预后差相关。DRD1的表达上调通过调节cAMP/PI3K/AKT/CREB通路,激活HCC增殖和转移的恶性表型,而DRD1下调则发挥相反作用。阻断DRD1逆转了多巴胺对HCC的作用。DRD1选择性拮抗剂SCH23390在体内和体外实验中均抑制了HCC细胞的增殖和转移。结论在HCC局部多巴胺分泌增加,并促进了HCC细胞的增殖和转移。DRD1对HCC进展起到促进作用,并在多巴胺系统中发挥关键作用,可作为HCC潜在的治疗靶点和预后分子标志物。