肺癌差异表达cDNA序列的分离与鉴定

摘要

背景与目的:肺癌癌变的分子机理至今还不很清楚,其关键是未找到与肺癌密切相关的基因。本研究拟分离和鉴定肺癌差异表达cDNA序列,为进一步克隆肺癌相关基因打下基础。方法:采用mRNA差异显示、克隆、反向点杂交、测序和Reversetranscription-PCR(RT-PCR)方法分离在肺癌组织和肺癌细胞系中表达下调或不表达,以及在肺癌组织和肺癌细胞系中过表达的差异cDNA序列。结果:mRNA差异显示获得16条差异的片段。将差异片段进行克隆、反向点杂交、测序、同源性比较,共获得10条不同的cDNA序列。其中2条为新基因,8条与已知基因高度同源。进一步RT-PCR证实LXDD1、LXDD2两条cDNA序列在肺癌及正常肺支气管粘膜组织中存在差异表达。结论:运用mRNA差异显示,成功分离了10条差异表达cDNA序列,并证实其在肺癌及正常肺支气管粘膜组织中存在表达差异。这些差异表达cDNA序列可能与肺癌的发生发展密切相关。