乳腺癌耐药细胞ER表达状态影响细胞对屈洛昔芬和阿霉素的敏感性

摘要

背景与目的:雌激素受体( estrogen receptor, ER)阳性乳腺癌细胞株来源的耐药细胞株中, ER表达缺失或下降 ,且细胞生长速度减慢.本文的目的是研究 MCF- 7/Adr乳腺癌耐药细胞株中 ER表达状态与细胞对屈洛昔芬( droloxifene, Dro)和阿霉素( Adriamycin, Adr)敏感性之间的关系.方法: Western blot法检测 MCF- 7/Adr及其亲本 MCF- 7细胞中 ER蛋白的表达,构建 ER的真核细胞表达质粒 (pCER),利用 LipofectAMINETM将 ER基因导入 MCF- 7/Adr细胞,经 G418抗性筛选获得阳性克隆( MTER/Adr), PCR、Western blot法鉴定并检测 ER基因的整合和蛋白表达, 流式细胞仪检测细胞周期变化, MTT法检测 Dro及 Adr对细胞增殖的影响.结果:在 MCF- 7细胞中可检测到 ER蛋白的表达,而 MCF- 7/Adr细胞中使用 Western blot检测不到 ER蛋白的表达.成功构建真核细胞表达质粒 pCER并转染 MCF- 7/Adr细胞,阳性克隆 MTER/Adr整合了 ER基因并获得表达.经 MTT分析, 10 μ mol/L Dro对 MCF- 7细胞的生长有明显的抑制作用,而到 20 μ mol/L时对 MCF- 7/Adr细胞的生长有抑制作用. ER转染 MCF- 7/Adr细胞后, 15 μ mol/L的 Dro对其生长出现抑制作用,使细胞多分布于 G0/G1期.同时细胞对 Adr的敏感性下降.结论: MCF- 7/Adr细胞中 ER的丢失引起细胞对以 ER为靶点的 Dro治疗不敏感, ER转染的 MCF- 7/Adr细胞部分恢复对 Dro和 Adr的敏感性.