脐血淋巴细胞抗白血病活性的实验研究

摘要

背景与目的:研究表明脐血移植(cordbloodtransplantation,CBT)保留有移植物抗白血病(graft鄄versus鄄leukemia,GVL)效应。如果能诱导脐血淋巴细胞生成特异性的细胞毒T淋巴细胞(cytotoxicTlymphocytes,CTLs),清除患者体内的微小残留病灶(minimalresidualdisease,MRD),就有可能彻底治愈白血病。本研究的目的是研究脐血是否能在体外诱导生成CTLs,以及所生成的CTLs是否能特异性杀伤白血病细胞,从而确定脐血淋巴细胞的利用价值以及将之用于CBT的可行性。方法:联合细胞因子体外诱导脐血单个核细胞(mononuclearcells,MNCs)分化为树突细胞(dendriticcell,DCs),再吞噬凋亡白血病细胞并将其抗原提呈给相同脐血的T淋巴细胞,以得到CTLs。倒置显微镜及流式细胞仪等方法检测DCs。CTLs对相应白血病细胞的杀伤功能用乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)释放法测定。结果:8份标本均可培养出形态典型的DCs,培养前DCs的表面标志物CD1a、HLA鄄DR、CD86、CD83的表达分别为(1.8±1.9)%、(19.4±10.6)%、(7.5±5.3)%、(1.4±1.1)%,培养后分别为(29.6±13.8)%、(81.1±17.8)%、(42.7±21.9)%、(8.0±6.9)%,差异有显著性(P<0.05)。效、靶比为50∶1时,CTLs对未经培养的急非淋白血病细胞的杀伤率为(52.6±21.0)%。