组蛋白去乙酰化酶抑制剂协同紫杉醇对人肺癌细胞株抑制作用及机制

摘要

背景与目的:组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂通过抑制多种基因或蛋白介导的信号转导网络的功能,影响细胞增殖及对化疗药物的敏感性。HDAC抑制剂可能会提高紫杉醇对肺癌细胞的抑制作用。本研究评价HDAC抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)协同紫杉醇抑制肺癌细胞H322及H1299的作用及机制。方法:将H322和H1299细胞分别分成4组:(1)对照组;(2)紫杉醇组(TAX);(3)TSA组;(4)以TSA预先作用12h后,再使用紫杉醇的联合用药组(TF)。分别以MTT法、流式细胞术检测细胞增殖情况以及细胞周期、细胞凋亡等指标的变化,荧光显微镜观察细胞核形态的改变,Western blot检测Survivin、PARP蛋白及细胞外信号调节激酶(ERK)的表达。结果:TSA明显增强了紫杉醇对两种肺癌细胞的抑制率。紫杉醇作用96h对H322细胞的IC50由(48.07±26.12)nmol/L下降至(6.34±5.72)nmol/L,对H1299细胞的IC50由(110.6±38.7)nmol/L下降至(63.7±11.8)nmol/L,差异具有统计学意义(P<0.05)。TF组H322细胞凋亡率较TAX组明显增加(P<0.05);各组H1299细胞出现少量凋亡细胞,TF组的死亡细胞明显多于其他组。TAX上调H322细胞中pERK的表达,TSA及TF减低两种细胞中pERK表达;TAX明显增加Survivin的表达,TSA及TF下调了Survivin的表达。TAX组和TF组H322细胞中均检测到剪切PARP蛋白,TF组较TAX组剪切PARP蛋白明显增加,而H1299细胞各组均未检测到剪切PARP蛋白。结论:HDAC抑制剂TSA联合紫杉醇可以协同抑制H322及H1299细胞增殖,促进H322细胞凋亡和H1299细胞死亡。协同机制可能与通过下调肺癌细胞由紫杉醇诱发的Survivin高表达和阻断ERK通路的激活有关。