MiR-222对山羊副流感病毒3型复制的影响

摘要

为探讨miR-222对山羊副流感病毒3型(CPIV3)复制的影响及其机制.本研究将miR-222模拟体转染MDBK细胞,接种CPIV3病毒液,收集上清和细胞,测定病毒效价和干扰素(IFN)含量;通过TargetScan和miRanda等生物信息学软件预测miR-222调控的靶基因,用双荧光素酶报告系统验证其靶基因,RNA干扰技术研究靶基因对CPIV3复制的影响.结果显示,miR-222模拟体能抑制CPIV3复制,转染miR-222组IFN的表达水平较高,且病毒复制效价(102.5 TCID50·0.1 mL-1)显著低于miRNA阴性对照组(103.3 TCID50·0.1 mL-1);双荧光素酶报告系统验证和qPCR检测得出,miR-222可靶向结合IRF2的3'-UTR,并降解IRF2的mRNA和抑制IRF2蛋白表达;敲除IRF2的MDBK细胞感染CPIV3后,病毒复制效价(102.0 TCID50·0.1 mL-1)低于正常MDBK细胞组(103.2 TCID50·0.1 mL-1).本研究表明,miR-222通过靶向降解IRF2 mRNA提高IFN表达水平来抑制CPIV3复制,为基于miR-222研制潜在抗病毒药物提供基础资料.