猪胰岛素启动子序列分析及调控基因在胰腺组织特异性表达验证

摘要

通过对不同中国地方猪品种胰岛素基因启动子序列差异分析,可为转基因调控我国小型猪胰腺β细胞功能研究和糖尿病模型制备提供依据.本研究利用PCR从通城猪、广西巴马小型猪和五指山小型猪3个品种猪基因组DNA中扩增猪胰岛素启动子全长,经比对分析获得具有地方猪品种特征的序列,在小鼠胰腺瘤细胞和转基因鼠中验证该序列调控目的基因表达的有效性和特异性.3个地方猪品种间1.5 kb长的胰岛素启动子序列无碱基差异,与国外猪品种仅有3个碱基差异;双荧光素酶报告基因检测系统证明该启动子能在胰腺瘤细胞高效启动下游基因表达;转CHOP和UCP2基因小鼠中,2个目的基因在胰腺组织中表达量显著高于肝脏、背肌和肾脏,且胰腺组织中蛋白丰度显著增加.本研究结果表明,从中国地方猪品种中分离的胰岛素启动子能够特异性调控目的基因在胰腺组织中表达,为转基因调控猪β细胞功能的动物模型建立奠定了基础.