WT1和FGF9基因在克隆猪隐睾中mRNA表达和DNA甲基化状态分析

摘要

为探究本课题组获得的2头体细胞克隆猪隐睾症形成的可能原因,本研究利用相对荧光定量PCR技术检测了WT1和FGF9基因在睾丸组织中mRNA表达量变化,同时利用亚硫酸氢盐测序法分析了其启动子区CpG岛甲基化状态.结果表明:WT1和FGF9基因在2头克隆猪睾丸中表达量均高于对照组,其中克隆猪C1中2个基因的表达量与对照组相比差异明显(3.49、9.83vs 1.00).亚硫酸氢盐测序结果显示,WT1基因启动子区在克隆猪C1和C2中的甲基化程度没有明显变化,而FGF9基因启动子区2个CpG岛在克隆猪C1中甲基化程度高于对照猪N(94.54％vs 18.18％,71.11％vs 26.67％),而在克隆猪C2中不明显.综上表明:WT1基因的异常表达可能是引起克隆猪发生隐睾的原因之一,但其甲基化水平不是影响该基因异常表达的因素;克隆猪C1睾丸组织FGF9基因启动子区发生超甲基化,这可能导致其mRNA表达异常,从而成为诱导克隆猪隐睾发生的可能原因.