共表达3种纤维素降解酶的转基因小鼠模型的建立与分析

摘要

本研究旨在应用转基因技术制作能特异性分解纤维素和木质素的转基因单胃动物,对于培育高饲料转化率的家畜具有重要的研究意义.利用2A肽策略构建由EF1α启动子驱动的可同时表达3种能够降解纤维素和木质素的酶(EGXA、BGL4和XYNB)的真核表达载体,并通过原核显微注射技术获得同时表达3种酶的转基因小鼠.经检测发现,2A肽能够介导3种酶同时在HEK293A细胞中正常表达.通过酶活分析、Western blot和免疫组织化学等检测发现,3种酶均能在转基因小鼠消化系统各组织中表达,并且具有正常活性.本研究结果表明,在EF1α启动子的控制下,2A肽能够在小鼠中介导EGXA、BGL4和XYNB的正常表达,并成功建立表达外源纤维素酶和木质素酶的转基因小鼠模型,为培育具有高饲料转化率的动物奠定研究基础.