高效液相色谱法测定唾液乳杆菌脱基因毒性作用

摘要

采用高效液相色谱法(HPLC)测定唾液乳杆菌对4-硝基喹啉-N-氧化物(4-NQO)基因毒性的抑制作用.Lact.salivarius FDB89与4-NQO(终浓度为20 mg/L)共培养后,利用SOS-显色反应法检测唾液乳杆菌的脱基因毒性作用,同时采用高效液相色谱分析共培养前后的4-NQO含量变化.色谱分析条件为:C18反相色谱柱(kromasil100_5 C18),以乙腈、水为流动相进行梯度洗脱,流速1 mL/min;检测波长365 am.结果表明,唾液乳杆菌转化4-NQO,降低了4-NQO的基因毒性;HPLC测定的4-NQO峰面积与SOS-显色反应测定的基因毒性值呈正相关,相关系数r2为0.991.HPLC方法测定脱基因毒性检出限为1.2 ng,菌体浓度在106～109cfu/mL范围内回收率为85%～98%.HPLC法测定唾液乳杆菌的脱基因毒性操作简单,其重复性和精确度均优于SOS-显色反应,可以采用HPLC代替SOS-显色反应.本研究在应用仪器分析方法代替生化分析方法测定乳杆菌脱基因毒性方面提供了一条新思路.