金雀异黄素对类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞骨保护素/细胞核因子κB受体活化因子/细胞核因子κB受体活化因子配体通路的影响

摘要

目的 研究金雀异黄素(genistein,Gen)对人类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/细胞核因子κB受体活化因子(receptor-activator of nuclear factor kappa bata,RANK)/细胞核因子κB受体活化因子配体(receptor-activator of nuclear factor kappa bata ligand,RANKL)通路的影响及机制.方法 培养人RA-FLS,并分为对照组(RA-FLS细胞)、TNF-α组(RA-FLS细胞+TNF-α 10 ng/ml)、TNF-α+ Gen组(RA-FLS细胞+TNF-α 10 ng/ml+ Gen 50 μM)、Gen组(RA-FLS细胞+Gen 50 μM).应用免疫印迹检测Gen作用RA-FLS的RANK、RANKL、OPG、雌激素受体(estrogen receptor α,ERα)表达情况,免疫荧光检测ERα细胞内分布情况.结果 Gen组、TNF-α组及TNF-α+ Gen组细胞内RANK蛋白表达量较对照组无明显差异(P＞0.05),但OPG及RANKL蛋白表达明显高于对照组(均P＜0.05).Gen组OPG/RANKL较对照组增高(P＜0.05).Gen组、TNF-α组及TNF-α+ Gen组细胞内ERα蛋白表达量与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).免疫荧光结果显示核内ERα表达量增加.结论 Gen可能通过与雌激素受体结合,转入核内发挥免疫调节作用,从而调节OPG/RANKL/RANK通路,发挥抑制骨破坏的作用.Gen可以上调人RA-FLS中OPG及RANKL,且对OPG的上调作用更强.