川芎嗪对脓毒症致急性肝损伤大鼠肝细胞线粒体膜转运功能保护作用的实验研究

摘要

目的 探讨川芎嗪对脓毒症致急性肝损伤（SALI）大鼠肝细胞线粒体膜转运功能的保护作用.方法 按随机数字表法将SD大鼠分为假手术组、SALI模型组〔采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制模〕、川芎嗪治疗组（CLP术后经尾静脉注入盐酸川芎嗪60 mg/kg）和川芎嗪预防组（CLP术前7 d,每日经尾静脉注射盐酸川芎嗪60 mg/kg）,每组12只.各组于术后10 h取腹主动脉血和肝脏,用酶耦联速率法测定血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）和线粒体型天冬氨酸转氨酶（m-AST）水平;用比色和化学荧光素法检测肝细胞三磷酸腺苷（ATP）含量;用磷定量化方法检测肝细胞线粒体ATP酶活性;用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测肝细胞线粒体膜水通道蛋白8（AQP8）、肉毒碱棕榈酰基转移酶（CPT）的表达.结果 与假手术组相比,SALI模型组、川芎嗪治疗组和川芎嗪预防组血清ALT、AST和m-AST水平显著升高,肝细胞ATP含量显著降低,肝细胞线粒体膜ATP酶活性、AQP8和CPT-1A的表达量明显下降.与SALI模型组相比,川芎嗪治疗组和川芎嗪预防组血清ALT、AST和m-AST水平显著降低〔ALT（U/L）：123.8±32.8、105.0±44.5比233.0±110.1,AST（U/L）：427.0±117.9、303.9±110.3比742.6±441.4,m-AST（U/L）：239.6±64.9、168.2±60.0比412.8±252.6,均P＜0.01〕,肝细胞ATP含量均显著升高（nmol/mg：29.5±10.3、34.6±11.2比19.3±8.8,均P＜0.01）,线粒体膜ATP酶活性也均显著升高〔Na＋-K＋-ATP酶（U/mg）：3.91±0.30、3.97±0.35比2.87±0.82,Mg2＋-ATP酶（U/mg）：3.75±0.38、3.88±0.35比2.64±1.06,Ca2＋-ATP酶（U/mg）：3.15±0.58、2.98±0.31比1.75±1.25,Ca2＋-Mg2＋-ATP酶（U/mg）：3.82±0.31、3.91±0.42比2.57±1.01,均P＜0.01〕,线粒体膜AQP8和CPT-1A的表达量明显升高〔以假手术组（100%）为参照,AQP8/COX-Ⅳ：（79.12±7.79）%、（88.40±9.22）%比（62.08±11.91）%,CPT-1A/COX-Ⅳ：（87.92±10.06）%、（84.91±17.48）%比（72.11±7.82）%,均P＜0.01〕,其中川芎嗪预防组较川芎嗪治疗组血清AST、m-AST水平降低更为显著〔AST（U/L）：303.9±110.3比427.0±117.9,m-AST（U/L）：168.2±60.0比239.6±64.9,均P＜0.05〕.4组间肝细胞线粒体膜CPT-2表达量差异无统计学意义.结论 川芎嗪可以保护SALI大鼠肝细胞线粒体膜转运水、离子和脂肪的功能;川芎嗪对脓毒症的预防作用要优于治疗作用.