人早老素15’端390碱基片段的真核表达载体的构建与鉴定

摘要

目的：构建表达人早老素1N端部分肽段的基因重组质粒。方法：实验于2004“12／2005—01在北京老年医学研究所神经生物研究室完成。参照人早老素1mRNA结构设计合成含适当酶切位点的聚合酶链反应引物，从质粒pBS-Presenilinsl扩增其5’端390bp的cDNA片段，插入质粒pGEX-4T-1，转化人大肠杆菌BL21（DE3），以异丙基-B-D-硫代半乳糖苷诱导表达，使其在大肠杆菌中表达以谷胱甘肽S转移酶为标签的融合蛋白质。用凝血酶定点分解融合蛋白，并应用亲和层析法纯化早老素1N130肽。