人参皂苷Rb1通过调节TGF-β1/Smad3信号通路抑制肾小管上皮细胞-间质转化

摘要

目的研究人参皂苷Rb1(G-Rb1)对肾小管上皮细胞-间质转化(EMT)的影响及可能机制。方法采用10 ng/mL生长因子β_(1)(TGF-β_(1))诱导人肾小管上皮细胞HK-2发生EMT。观察10、20、30μmol/L G-Rb1作用48 h后HK-2细胞的形态学变化;测定1.0、2.5、5.0、10、20、30μmol/L G-Rb1作用24 h后人胚胎肾细胞HEK293中报告基因载体SBE转录活性,并测定上述浓度G-Rb1作用24 h后对HK-2细胞相对活力的影响。检测10、20、30μmol/L G-Rb1作用24 h后HK-2细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)、纤连蛋白(FN)mRNA的表达;检测10、20、30μmol/L G-Rb1作用24 h后HK-2细胞中α-SMA、Smad家族成员3(Smad3)、磷酸化Smad3(p-Smad3)、COL-Ⅰ、FN和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达。结果10~30μmol/L G-Rb1能够抑制TGF-β_(1)诱导的HK-2细胞发生EMT,显著抑制因TGF-β_(1)刺激导致的SBE转录活性升高(P0.05)。在TGF-β_(1)诱导下,细胞中α-SMA、COL-Ⅰ、FN蛋白及其mRNA和Smad3、p-Smad3蛋白的表达均显著上调(P<0.05),E-cadherin蛋白的表达显著下调(P<0.05);而G-Rb1则可有效地逆转上述蛋白或mRNA的表达。结论G-Rb1可在一定程度上保护肾小管上皮细胞免受TGF-β_(1)诱导引起的EMT,这可能与其抑制了TGF-β_(1)/Smad3信号通路的激活有关。