扶脾柔肝颗粒对肝纤维化模型大鼠的改善作用机制研究

摘要

目的:研究扶脾柔肝颗粒(FRG)对肝纤维化模型大鼠的改善作用机制.方法:将大鼠随机分为空白组、模型组、秋水仙碱片组(化学药阳性对照,0.2 mg/kg)、扶正化瘀胶囊组(中药阳性对照,0.415 g/kg)和FRG低、中、高剂量组(20、40、80 g/kg),除空白组和模型组各11只大鼠外(各取1只用于判断是否造模成功),其余每组10只.除空白组外,其余各组大鼠腹腔注射50％CCl4橄榄油溶液并灌胃30％乙醇以复制肝纤维化模型.造模成功后,各给药组大鼠灌胃相应药物,空白组和模型组大鼠灌胃等体积生理盐水,每天1次,连续4周.末次灌胃后,观察大鼠肝组织病理形态学变化;检测大鼠血清中透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)水平;检测大鼠肝组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达水平;检测大鼠肝组织中蛋白激酶B(Akt)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)的mRNA和蛋白表达水平.结果:与空白组比较,模型组大鼠肝小叶结构紊乱,纤维组织增生明显,部分有假小叶形成;血清中HA、LN、PCⅢ、ColⅣ水平和肝组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达水平以及Akt、AMPK、mTOR、p70S6K的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.01).与模型组比较,FRG各剂量组大鼠肝组织损伤明显减轻,血清和肝组织中上述指标(FRG低剂量组LN、PCⅢ除外)水平均显著降低(P<0.05或P<0.01).结论:FRG可改善大鼠肝纤维化,其作用机制可能与下调肝组织中自噬相关蛋白和Akt/AMPK/mTOR/p70S6K信号通路相关蛋白的表达有关.