胡桃楸枝和根中5个成分含量测定方法的建立及其含量差异分析

摘要

目的:建立同时测定胡桃楸枝和根中没食子酸、逆没食子酸、1,6-二-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖、1,2,6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖、1,2,3,6-四-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖等5个成分含量的方法,并分析枝和根中上述5个成分的含量差异.方法:采用高效液相色谱法,以Agilent Poroshell 120 SB-C18为色谱柱,以水(含0.2％甲酸)-乙腈(含0.2％甲酸)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,柱温为30°C,检测波长为270 nm,进样量为5μL.利用独立样本t检验和偏最小二乘法判别分析对5个成分含量进行比较分析.结果:没食子酸、逆没食子酸、1,6-二-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖、1,2,6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖、1,2,3,6-四-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖检测质量浓度的线性范围分别为0.989～63.3、1.58～101、1.01～64.7、3.31～212、3.34～214μg/mL(r≥0.9973);精密度、重复性、稳定性(12 h)试验的RSD均小于3.2％,平均加样回收率分别为103.2％、99.1％、101.5％、102.9％、104.7％(RSD分别为4.85％、2.80％、1.31％、2.73％、1.28％).在胡桃楸枝中,上述成分的平均含量分别为0.2965、0.6211、0.5625、3.1117、3.4513 mg/g;在根中,上述成分的平均含量分别为0.6734、2.7555、0.9640、2.9466、4.8364 mg/g;在枝、根中上述成分的平均总量分别为8.0432、12.1759 mg/g.根中没食子酸、逆没食子酸和1,6-二-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖含量均显著高于枝中的含量(P<0.05或P<0.01),而枝和根中其余2个成分的含量及5个成分的总量比较差异均无统计学意义(P>0.05).偏最小二乘法判别分析所建模型的累积解释度(R 2X、R 2Y)、累积预测度(Q 2)分别为0.943、0.745、0.710;模型载荷图显示,逆没食子酸与原点距离最远,仅逆没食子酸含量的变量投影重要性值大于1.结论:成功建立了可同时测定胡桃楸枝和根中5个成分含量的方法.除1,2,6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖外,胡桃楸根中其余4个成分的含量及总含量均高于胡桃楸枝,逆没食子酸是区分两类样品的主要差异成分.