HPLC-一测多评法结合色差原理分析不同生长年限北苍术药材的质量

摘要

目的:建立同时测定北苍术中白术内酯Ⅱ、β-桉叶醇、苍术素、苍术酮含量的方法,并结合色差原理评价不同生长年限北苍术药材的质量.方法:采用高效液相色谱(HPLC)法进行测定,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18,流动相为乙腈-0.2％磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长分别为208 nm(白术内酯Ⅱ、β-桉叶醇)、340 nm(苍术素)和220 nm(苍术酮),进样量为15μL.以苍术素为内参物,采用一测多评法建立白术内酯Ⅱ、β-桉叶醇、苍术酮的相对校正因子,并计算不同生长年限北苍术药材中各成分的含量;同时,采用外标法测定上述成分含量,并与一测多评法结果进行比较.基于色差原理对不同生长年限北苍术药材粉末进行颜色测定,采用Pearson相关分析法对苍术药材中上述4种成分含量与其颜色进行相关性分析.结果:白术内酯Ⅱ、β-桉叶醇、苍术素、苍术酮的分离度均大于1.5,检测质量浓度线性范围分别为1.01～10.10、3.30～33.00、4.40～44.00、5.34～53.40μg/mL,精密度、重复性、稳定性试验的RSD均小于2％,平均加样回收率为101.34％～104.67％(RSD<1.5％,n=6);以苍术素为内参物,白术内酯Ⅱ、β-桉叶醇、苍术酮的平均校正因子分别为3.8967、5.9282、9.7279,RSD分别为0.35％、2.89％、0.36％(n=6).采用一测多评法与外标法测得的24批北苍术药材中3种成分(除苍术素外)含量的相对偏差在0.03％～1.45％之间,表明2种方法测定结果一致,且各成分含量随药材生长年限的增加而升高.北苍术药材中白术内酯Ⅱ、β-桉叶醇、苍术素、苍术酮与其颜色亮度(L*)、色差值(E*ab)呈显著负相关(P<0.01),与红绿色度(a*)、黄蓝色度(b*)呈显著正相关(P<0.01).结论:HPLC-一测多评法可用于北苍术药材中白术内酯Ⅱ、β-桉叶醇、苍术素、苍术酮的含量测定;药材生长年限越长,各成分含量越高;药材颜色与各成分含量显著相关,且颜色偏暗黄棕色的北苍术药材的有效成分含量较高.