沉默AQP3基因表达对结直肠癌细胞增殖、凋亡和化疗敏感性的影响

摘要

目的 探讨沉默水通道蛋白3(AQP3)基因表达对结直肠癌细胞增殖、凋亡和化疗敏感性的影响.方法 体外培养结直肠癌细胞LoVo,采用梯度浓度诱导法建立紫杉醇耐药细胞株LoVo/Taxol.将LoVo细胞和LoVo/Taxol细胞分别分为空白对照组(细胞不做任何特殊处理)、阴性对照组(转染阴性对照质粒)、shAQP3组(沉默AQP3表达),逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot法检测AQP3 mRNA和蛋白表达.CCK-8实验检测细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞的凋亡情况.四唑化合物(MTS)检测紫杉醇的细胞毒性.结果 人结肠癌细胞LoVo中AQP3 mRNA相对表达量和蛋白表达量均高于人正常结肠上皮细胞NCM460和HCoEpiC,差异有统计学意义(P<0.05).敲低AQP3表达后,shAQP3组LoVo细胞增殖活性(OD值)较空白对照组和阴性对照组降低,同时凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05).成功构建LoVo/Taxol耐药细胞,对紫杉醇、5-Fu、阿霉素的耐药指数分别为(31.97±1.78)、(17.97±2.14)、(104.80±5.53).而shAQP3组LoVo/Taxol细胞对紫杉醇、5-Fu、阿霉素的耐药指数分别为(6.06±0.25)、(5.57±0.20)、(21.23±0.27),较空白对照组和阴性对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 沉默AQP3基因表达能够抑制结直肠癌细胞增殖,促进结直肠癌细胞凋亡并增强LoVo/Taxol耐药细胞的化疗敏感性.