金莲清热泡腾片抗流感病毒体内外药效实验及作用机制研究

摘要

目的研究金莲清热泡腾片体内外抗流感病毒的药效学及作用机制。方法进行体外实验考察金莲清热泡腾片对甲1型流感病毒株(NYMCX-179A)、甲3型流感病毒株(NYMCX-327)和乙型流感病毒株(B/Phuket/3073/2013)的作用,采用细胞病变效应(CPE)法检测高、中、低3个浓度下药物有效浓度(EC_(50)),以及在细胞病毒感染后的不同时间点药物的作用情况及病毒滴度(TCID_(50))。进行体内实验考察金莲清热泡腾片对甲1型流感病毒(鸡胚扩增)的作用,计算小鼠存活率、生存时间;观察肺组织切片;CPE法、四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法、血球凝集(HA)法测定其TCID_(50)。蛋白免疫印迹技术(WB)检测肺组织中H1N1病毒血凝素(HA)蛋白,探讨抗病毒机制。结果在体外实验中,预防模式用药和治疗模式用药的金莲清热泡腾片高、中、低3个浓度均能明显抑制甲1型流感病毒10 TCID_(50)、甲3型流感病毒10 TCID_(50)、乙型流感病毒株100 TCID_(50)引起的细胞病变,其中金莲清热泡腾片高浓度组效果优于中、低浓度;细胞感染甲1型流感病毒后,0、2、4、6、8、10、12 h给药(最大有效浓度为5 mg/ml),显示金莲清热泡腾片均可在流感病毒复制的1个周期内有效抑制病毒的复制,子代病毒产量显著降低;体内抗甲1型流感病毒实验结果显示,金莲清热泡腾片高、中、低浓度组在治疗初期就有抗H1N1病毒的作用,在第4天后作用更明显,金莲清热泡腾片高浓度组第6天肺内病毒活性基本抑制,肺组织病理损伤基本恢复。WB实验表明该药可抑制H1N1病毒在肺组织中的HA蛋白表达。结论金莲清热泡腾片具有显著的抗流感病毒作用,可用于治疗因病毒引起的流感或上呼吸道疾病。