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人参皂苷Rg1对人脐血间充质干细胞活性和成血管分化的影响

         

摘要

目的 探讨人参皂苷Rg1(GS-Rg1)对人脐血间充质干细胞(MSC)体外活性和向血管内皮分化的影响.方法 无菌条件下取正常剖宫产胎盘中的人脐血,经密度梯度离心法分离得到单个核细胞,细胞培养呈长梭形时,进行成骨、成软骨及成脂诱导分化鉴定.将通过鉴定的人脐血MSCs分别用0、5、10、20、40、80 mg/L的GS-Rg1进行干预,确定GS-Rg1促人脐血MSCs增殖的最佳浓度.然后将人脐血MSCs分为实验组和对照组,用最佳浓度的GS-Rg1对实验组进行处理,对照组采用等体积的磷酸盐缓冲液处理.使用CCK-8法研究两组细胞活性,Matrigel实验研究两组体外血管新生的情况.同时用免疫荧光检测内皮细胞标志物血小板-内皮细胞黏附分子-1(CD31)、血管性血友病因子(vWF)表达情况.结果 显微镜下可见细胞形态均一,呈长梭形的成纤维细胞样形态,是MSCs的典型形态.成骨、成软骨和成脂诱导分化鉴定染色结果均可见大量深染色部分,显示其为MSCs.GS-Rg1浓度为40、80mg/L时,人脐血MSCs光密度值高于其浓度为0、5、10、20 mg/L时,差异有统计学意义(P<0.05).GS-Rg1浓度为80 mg/L时,人脐血MSCs光密度值与其浓度为40 mg/L时比较,差异无统计学意义(P>0.05).实验组细胞活性、管腔长度及CD31、vWF荧光强度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 GS-Rg1具有促进人脐血MSCs体外增殖和诱导其向内皮细胞分化及体外血管生成的潜能.

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