时间分辨荧光法检测乙肝表面抗原LOD及参考区间的验证和建立

摘要

目的 验证时间分辨荧光分析法检测乙肝表面抗原(HBsAg)的检出限(LOD),评价参考区间的合适性.方法 自2017年10月～2018年1月对HBsAg二级标准物倍比稀释后采用时间分辨荧光分析法及酶联免疫吸附法(ELISA)进行配对检测,标准物浓度除以稀释后检测结果出现阴性的上一稀释度为LOD,验证厂商的声明,比较两种方法检测同一稀释度样品结果,评估厂商声明的参考区间的合适性;根据美国临床实验室标准委员会(CLSI)EP17-A2规定的方法建立空白限(LOB)及LOD,评价已建立的LOD作为参考区间上限的合适性.结果 时间分辨荧光法的LOD验证结果为0.1 U/mL,与厂商声明相符.如使用时间分辨荧光检测系统厂商声明的参考区间,标准物稀释3倍后结果判为假阴性,与ELISA检测结果不符.重庆医科大学附属永川医院(以下简称"我院")检验科建立的HBsAg的LOB及LOD分别为0.048 ng/mL及0.137 ng/mL,如以我院检验科建立的LOD制订参考区间,稀释3倍后两种方法结果一致,均为阳性.结论 时间分辨免疫荧光分析系统声明的LOD可以接受,但厂商声明的参考区间不适宜,易导致假阴性.检验科应建立自己的LOD来制订参考区间.建议在对病毒标志物定量检测项目进行性能验证时增加参考区间的验证.