人脐带血间充质干细胞通过抑制MEK/ERK通路改善LPS诱导的AECⅡ凋亡机制的研究

摘要

cqvip:目的探讨人脐带血间充质干细胞(hUC-MSC)对脂多糖(LPS)诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)凋亡的影响,及MEK/ERK信号通路在其中的作用。方法采用LPS与A549细胞共培养建立AECⅡ凋亡模型;将凋亡模型按随机数字表法分成6组,分别与MSC条件培养基(MSC-CM)、MEK/ERK通路抑制剂(PD98059)及PBS体外共培养,分别为A549+LPS+MSC、A549+LPS+PBS、A549+LPS+PD98059,阴性对照组为A549+PBS、A549+MSC、A549+PD98059,48 h后采用流式细胞术检测A549细胞凋亡情况;对MEK/ERK通路及凋亡相关信号(BAX/BCL-2、FAS、caspase 3及caspase 8)进行qPCR检测,对A549+LPS+MSC、A549+LPS+PBS、A549+PBS、A549+MSC四组组进行Western blot检测。结果建立A549+LPS凋亡模型。A549+LPS+MSC、A549+LPS+PD98059组与A549+LPS+PBS比较,凋亡率显著下降。A549+LPS+MSC及A549+LPS+PD98059的MEK、ERK、BAX/BCL-2、caspase 3及caspase 8 mRNA扩增倍数均显著低于A549+LPS+PBS(P0.05)。结论hUC-MSCs可能通过旁分泌作用抑制MEK/ERK信号通路磷酸化,影响内源性线粒体及外源性FAS/FASL途径进而减轻LPS诱导的AECⅡ凋亡。