细胞自噬对岩大戟内酯B诱导的白血病细胞HL-60凋亡的影响

摘要

目的 探讨自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)和自噬激动剂雷帕霉素(RAPA)对岩大戟内酯B诱导的人白血病细胞系HL-60细胞凋亡的影响.方法 采用Western blot分析检测不同浓度的岩大戟内酯B作用不同时间后LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和自噬调节因子Beclin-1等的表达;将HL-60细胞分为空白对照组、岩大戟内酯B组、岩大戟内酯B联合5 mmol/L 3-MA组、岩大戟内酯B联合10 mmol/L 3-MA组、岩大戟内酯B联合10 nmol/LRAPA组和岩大戟内酯B联合20 nmol/L RAPA组.采用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞仪检测人白血病细胞系HL-60细胞的凋亡情况;检测Caspase-3蛋白酶的活性.结果 岩大戟内酯B能够诱导白血病细胞HL-60自噬,增加LC3-Ⅱ和自噬调节因子Beclin-1的表达(P＜ 0.05);3-MA可降低岩大戟内酯B诱导的HL-60细胞凋亡和Caspase-3的活性(P＜0.05),而RAPA则提高了岩大戟内酯B诱导的HL-60细胞凋亡率及Caspase-3的活性(P＜0.05).结论 岩大戟内酯B可诱导HL-60细胞自噬,细胞自噬在岩大戟内酯B诱导的HL-60细胞凋亡中起到了非常重要的作用.