载绿色荧光蛋白基因壳聚糖纳米粒载体的制备和转染的研究

摘要

目的优化试验条件,制备合适的壳聚糖纳米粒,并连接上质粒,研究壳聚糖纳米粒对DNA的结合能力.方法以离子交联法制备壳聚糖纳米粒,并送激光微粒度仪及扫描电子显微镜检测,了解粒径的分布与形态;通过静电吸附作用连接上增强型绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1(报告基因);经琼脂糖凝胶电泳分析载体与DNA结合能力,并通过紫外分光光度计检测其载药量和包埋率.结果微粒度分析仪及电镜检测证实壳聚糖纳米粒呈均匀分散的球形颗粒,最小粒径为50 nm,平均直径为95 nm.琼脂糖凝胶电泳的结果显示壳聚糖纳米粒能有效地结合增强型绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1,紫外分光光度计检测不同比例结合(纳米粒:质粒)pEGFP-C1质粒的壳聚糖纳米粒的包埋率分别为:100%(50:10),100%(50:20),92%(50:75)和65%(50:100).结论制备出粒径较小、均匀的壳聚糖纳米粒,并且壳聚糖纳米粒能有效地连接上质粒.