基于表面增强拉曼散射的纳米生物传感器用于p53基因的超灵敏检测

摘要

目的 制备超灵敏检测p53基因的基于表面增强拉曼散射的纳米生物传感器.方法 p53分子通过双官能团连接4-氨基苯硫酚(4-ATP)的方式固定在金纳米粒子上.p53-4-ATP纳米粒子系统的特征振动谱带用来识别p53分子,当这些分子被包含有单分子层天青蛋白分子中有对这种抑癌基因显著亲和力的识别衬底捕获.结果 由4-ATP介导交联p53～50 nm金纳米颗粒实现的拉曼信号增强使在浓度低至5×10-13 M时检测出这种蛋白.p53-4-ATP纳米粒子系统可显著提高拉曼指纹图谱信号,振动功能容易分辨,时间较为稳定,且在低浓度下很容易检测出目的蛋白及分析时间相对较短.铜蓝蛋白包被的基板与p53-4-ATP纳米粒子溶液孵育后,采用TM-AFM检测可观察到大的斑点,这表明纳米粒子在基板上有效沉积,及共存的铜蓝蛋白与p53之间特异性复合物的形成.结论 基于铜蓝蛋白的SERS方法检测p53肿瘤抑制基因的方法具有高灵敏度和选择性.能够检测到p53的最低浓度是5×10-13M,在血清甚至血清环境中其他生物分子存在的情况下能够选择性地检测到p53.