以牛Ⅰ型胶原作为细胞外基质的全层人工皮肤的构建

摘要

目的:构建以牛Ⅰ型胶原为细胞外基质的具有表皮层及真皮层的人工全层皮肤.方法: 常规的细胞培养方法培养人角质形成细胞和成纤维细胞.采用-70℃预冻后,真空干燥的方法获得胶原海绵支架,并使用紫外线和戊二醛双重交联胶原支架.分别在支架两侧接种人角质形成细胞和成纤维细胞培养出全层人工皮肤.结果: 在试验中所构建的真皮,成纤维细胞生长其中,电镜下可见成纤维细胞分泌出丝状物.所得到的具有表皮层和真皮层的全层皮肤,厚约2～3 mm.在表皮层有部分角质形成细胞形成了复层,但有部分仍为单层,在真皮层均质的胶原中可见均匀分布的成纤维细胞.结论: 我们构建出的人工皮肤具有类似于人类皮肤的表皮层和真皮层,其韧性较好,不易破裂,可以用于后续动物实验.