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猪内脂素重组蛋白溶液中内毒素的去除

         

摘要

本试验旨在探索4 ℃条件下蛋白的上样体积、流速和蛋白浓度对猪内脂素重组蛋白溶液中内毒素的去除效果和蛋白损失量的影响.该研究采用商品化、修饰过的多黏菌素B为介质,特异性地去除蛋白溶液中的内毒素.在4 C条件下,选用不同的上样体积(6、8、10、12 mL)、流速(0.125~0.75 mL/min)和蛋白浓度(0.9、1.2、1.3、1.7 mg/mL)进行内毒素的去除,使用内毒素检测试剂盒定量测定内毒素含量,使用BCA蛋白浓度测定试剂盒进行蛋白浓度的测定.试验结果表明:在4 ℃条件下,蛋白上样体积12 mL、流速0.125~0.25 mL/min时,内毒素的去除效果最佳,去除率高达99.5%,内毒素的残余量(1 EU/mL)在生物安全范围以内,并且蛋白的回收率高达90~95%.试验结果证明成功去除猪内脂素重组蛋白溶液中的内毒素,为该蛋白的相关功能研究和临床应用提供参考.

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