单增李斯特菌溶血素S llsB基因缺失株的构建及部分生物学特性研究

摘要

为分析单增李斯特菌溶血素S(listeriolysin S,LLS) llsB基因缺失对单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)生物学特性的影响,本研究利用同源重组构建了llsB基因缺失株LM90-△llsB,并以8周龄、体重40 g±5 g的健康昆明系雄性小鼠为试验动物对其生长特性、半数致死量(LD50)、脏器载菌量等生物学特性进行了初步研究.结果 显示,本研究成功构建了llsB基因缺失株;缺失株在体外连续培养20代过程中能稳定遗传.通过生长曲线测定发现,llsB基因缺失株生长活性略高于亲本株;小鼠感染试验结果显示,亲本株和缺失株的LD50分别为106.17和106.50 CFU;与亲本株相比,缺失株在小鼠肝脏和脾脏中的载菌量均极显著减少(P＜0.01),说明缺失株对小鼠的感染能力明显减弱.在小鼠脑中未检出单增李斯特菌.综上所述,llsB基因对LM90的部分生物学特性可能有直接或间接的调控作用,本试验结果为进一步研究LLS的致病机理及防控李斯特菌病提供一定的理论依据.