猪伪狂犬病病毒SA株的分离鉴定及其gE基因缺失株转移载体的构建

摘要

从某疑似猪伪狂犬病发病仔猪提取脑组织病料.病料处理后,经vero细胞连续分离培养,盲传7代后出现了典型细胞病变.PCR检测证实该分离病毒为猪伪狂犬病病毒;利用多种传代细胞系对该病毒的培养条件进行了优化,该病毒的最佳培养宿主为BHK-21细胞,且在该细胞的TCID50为10-9.25/0.1 ml.将含有YFP报告基因表达盒PM片段连接到pBluescript(M13-)载体后,分别克隆猪伪狂犬病病毒gE基因同源重组臂PL、PR片段,并将其连接到上述重组载体上.经鉴定,成功构建了猪伪狂犬病病毒gE基因缺失株转移载体.