猪植入前胚胎体外培养条件的优化

摘要

探讨了更换胚胎培养液及添加FBS、高渗透压和不同浓度VE对猪卵母细胞体外受精(IVF)和孤雌激活(PA)胚胎体外发育的影响,进一步优化了猪植入前胚胎体外培养体系.试验一:在第2天、第4天更换新的培养液(换液组),在换液基础上第4天更换为添加10%FBS的培养液(FBS组).试验二:胚胎分别在O.05 mol/L蔗糖(蔗糖组)和138 mmol/L氯化钠(氯化钠组)的PZM-3(300～320 mOsmol)中培养2 d后移至PZM-3(288 mOsmol)中培养5 d.试验三:在培养液中分别添加50、100和200μmol/L VE.对照组均在PZM-3(288 mOsmol)中培养7 d.结果表明:试验一,IVF和PA胚胎FBS组囊胚率显著高于对照组和换液组(P＜0.05);试验二,IVF胚胎氯化钠组卵裂率、囊胚率均显著高于对照组与蔗糖组(P＜0.05);试验三,IVF胚胎添加100 μmol/L VE组囊胚率显著高于对照组(P＜0.05).结果提示,在换液的基础上添加FBS有利于猪IVF和PA胚胎的体外发育;氯化钠调节的高渗透压可以促进猪IVF胚胎的早期发育;添加100μmol/L VE可以改善猪IVF胚胎的体外发育体系.