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定量检测牛雌性发育候选基因FOXL2表达方法的建立

         

摘要

本研究根据GenBank中登录的剂量敏感的翼状螺旋/叉头转录因子2(forkhead transcription factor 2,FOXL2)设计引物,构建包含FOXL2基因cDNA片段的质粒,作为中国荷斯坦牛FOXL2基因mRNA定量检测的标准品,建立了FOXL2基因mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法.结果表明,该方法特异性好,检测灵敏度达101拷贝,线性范围为101~106拷贝,阈值循环数(Ct)与PCR体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系(r=0.998689),扩增效率高(E=99.62%),可以作为检测牛FOXL2基因mRNA定量检测方法.%The primer was designed based on forkhead transcription factor 2CFOXL2), according to the sequence which was submitted on GenBank. A recombinant plasmid contained cDNA fragment of FOXL2 gene was constructed and used for the standard substance for quantitative detection of mRNA of the FOXL2 gene of Holstein, a Real-time PCR was developed for detection of FOXL2 gene. The results revealed this method had a good specificity, and the sensitivity was up to 101 , range from 101 to 106. The cutoff value Ct had a good linear correlation with PCR samples. This method can detecte FOXL2 gene in bovine quantitatively.

著录项

  • 来源
    《中国畜牧兽医》 |2012年第1期|1-5|共5页
  • 作者单位

    中国农业科学院特产研究所,吉林吉林132109;

    中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京 100193;

    中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193;

    中国农业科学院特产研究所,吉林吉林132109;

    中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193;

    中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193;

    中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193;

    中国农业科学院特产研究所,吉林吉林132109;

    中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 基因的表达;
  • 关键词

    FOXL2基因; 荧光定量PCR; TaqMan探针; 标准曲线;

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