猪传染性胃肠炎病毒S基因实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

摘要

据猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus of swine,TGEV)S基因序列设计1对特异性引物,通过对实时荧光定量RT-PCR反应条件的优化,建立了SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测TGEV的方法,同时对12份病料进行检测,并与常规RT-PCR进行比较.结果显示,该方法的敏感性达到43.07拷贝/μL,具有良好的特异性和重复性,而常规RT-PCR最低只检测到4.307×103拷贝/μL,敏感性较低.本试验建立的检测TGEV S基因的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT PCR方法为传染性胃肠炎的鉴别诊断及TGEV的分离鉴定奠定了技术基础.