磷酸二酯酶亚型抑制剂与细胞周期蛋白抑制剂对绵羊卵母细胞体外成熟的影响

摘要

选用磷酸二酯酶3(PDE3)特异性抑制剂Milrinone和PDE4特异性抑制剂Rolipram以及细胞周期蛋白依赖性激酶(cdk)抑制剂Roscovitine(ROSC)对绵羊卵丘卵母细胞复合物(COCs)的体外自发成熟进行研究,拟建立一种模拟体内卵泡环境的绵羊卵母细胞体外培养模型.以M-199为基础培养液,绵羊COCs在含有50μmol/L的Milrinone、Rolipram、ROSC或不含上述任何抑制剂的培养液中分别培养24h.COCs在含有50μmol/L ROSC的培养液中培养24h,转移到含有20IU/L FSH的培养液继续培养24h检查核相.结果表明:COCs在M-199基础培养液和含有Rolipram的培养液中都可以自发恢复减数分裂,但是在含有Milrinone或ROSC的培养液中减数分裂受到阻滞;并且ROSC对绵羊COCs体外自发成熟的抑制作用要远高于Milrinone(P<0.05).当COCs从ROSC转移到含有20IU/L FSH的培养液继续培养24h后,90.4%卵母细胞恢复到第2次减数分裂中期(MⅡ).上述结果表明PDE3和cdk在绵羊减数分裂恢复中具有重要的作用.