Gene silencing in Xenopus laevis by DNA vector-based RNA interference and transgenesis

摘要

一个基于向量的 RNAi 表示系统用 Xenopus 被开发热带是 U6 倡导者，它由 RNA 聚合酶 III 抄录小 RNA 基因。系统首先在一根 Xenopus laevis 房间线被验证，设计为 GFP 基因特定的短发卡 DNA。进 Xenopus XR1 房间的基于向量的 RNAi 和 GFP 基因的 Co-transfection 显著地减少了表示 GFP 房间和全面 GFP 荧光的数字。基于向量的 RNAi 随后在 GFP 转基因的 Xenopus 胚胎被验证。从 GFP 转基因的男性的精子原子核和 RNAi construct-incubated-sperm 原子核分别地被用于授精。GFP mRNA 和蛋白质被 RNAi 被约 60% 与控制相比在这些转基因的胚胎减少。这驾驶 transgene 的 RNAi 在在 Xenopus laevis 禁止 GFP 表示特定、稳定转基因的线。由基于向量的 RNAi 和 Xenopus transgenesis 的基因 silencing 可以提供一种选择因为“基因功能的压抑”在脊椎动物模型系统学习。