RNAi沉默STAT3基因表达对膀胱癌细胞T24及5637生长影响的实验研究

摘要

目的探讨应用 RNA 干扰（RNAi）技术沉默信号转导子与转录活化子（STAT3）基因对膀胱癌细胞株 T24及5637细胞的影响。方法针对 STAT3 mRNA 序列设计合成3对编码小干扰 RNA（siRNA）的 DNA 模板,构建 pGenesil-1-shRNA-STAT3重组质粒,转染人类膀胱癌细胞株 T24及5637细胞。通过半定量 RT-PCR、Western blotting 法检测 STAT3基因不同水平的表达情况,采用流式细胞仪检测转染后细胞周期的变化。结果成功构建 pGenesil-1-shRNA-STAT3重组质粒,并成功转染 T24及5637膀胱癌细胞;半定量 RT-PCR、Western blotting 结果显示,重组质粒转染组细胞的 STAT3基因表达在RNA 及蛋白水平上显著低于对照组（P＜0.05）;流式细胞仪的结果显示,重组质粒转染组细胞明显受到抑制并出现凋亡现象。结论 pGeneSil-1-shRNA-STAT3转染膀胱癌细胞株 T24及5637细胞后,可有效抑制STAT3的表达,并抑制膀胱癌细胞的生长。