沉默CXCR4基因对人子宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭及上皮间质转化相关蛋白表达的影响

摘要

目的探讨小分子干扰RNA（siRNA）干扰CXCR4基因对人子宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭及上皮间质转化因子Twist、Slug及E钙黏蛋白（E-cad）表达的影响。方法体外培养HeLa细胞,设计合成CXCR4基因siRNA（CXCR4-siRNA）转染至HeLa细胞,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖能力的变化,Transwell实验观察细胞侵袭能力的变化,蛋白印迹法检测CXCR4、Twist、Slug、E-cad蛋白表达的变化。结果与空白组及阴性对照组相比,CXCR4-siRNA转染至HeLa细胞后能抑制CXCR4蛋白的表达（0.959±0.197、0.932±0.141和0.379±0.022,F=16.286,P=0.004）。MTT结果显示:48及72 h时,CXCR4-siRNA组HeLa细胞的增殖活性受到抑制（48 h:0.846±0.034、0.823±0.025和0.744±0.039,F=7.379,P=0.024;72 h:0.996±0.026、0.964±0.059和0.829±0.051,F=10.425,P=0.011）。Transwell结果显示:48及72 h时,CXCR4-siRNA组HeLa细胞的侵袭力受到抑制（细胞穿膜数量为48 h:37.4±8.1、33.6±6.2和25.4±3.2,F=4.830,P=0.029;72 h:48.4±7.6、43.0±5.4和33.4±6.7,F=6.579,P=0.012）。转染后48 h,CXCR4-siRNA组HeLa细胞Twist及Slug蛋白的表达降低（Twist:0.93±0.11、1.00±0.17和0.53±0.07,F=10.962,P=0.010;Slug:0.52±0.08、0.47±0.06和0.19±0.03,F=25.579,P=0.001）,E-cad的表达增高（0.53±0.04、0.55±0.24和1.11±0.14,F=12.494,P=0.007）。结论沉默CXCR4基因的表达可以抑制HeLa细胞增殖,降低其侵袭力,通过下调Twist、Slug蛋白的表达,上调E-cad表达,抑制HeLa细胞上皮间质转化。