Rev-erb激动剂SR9009通过降低自噬抑制人结肠癌细胞系HCT116增殖

摘要

目的 探讨血红素调节核受体(Rev-erb)激动剂SR9009对结肠癌细胞系HCT116增殖活性的作用及其机制.方法 培养HCT116细胞,向培养液中加入Rev-erb激动剂SR9009,倒置相差显微镜观察细胞的增殖;选择SR9009的适宜浓度与作用时间,采用CCK-8法检测细胞活性;Real-time PCR检测Rev-erbα、Rev-erbβ 以及自噬基因Beclin1、LC3、p62的转录;Western blot检测Rev-erbα、Rev-erbβ、Beclin1、LC3和p62的蛋白表达.结果 1)与对照组相比,SR9009显著抑制HCT116细胞的增殖(P<0.05),SR9009的有效作用浓度为20μmol/L,作用时间为24 h.2)SR9009显著提高HCT116细胞Rev-erbα 和Rev-erbβ 的转录(P<0.01)以及蛋白表达水平(P<0.05).3)SR9009显著降低HCT116细胞Beclin1和LC3的表达水平(P<0.05),引起自噬底物p62累积.4)在SR9009处理基础上,用3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制自噬,HCT116细胞活性降低(P<0.05);用雷帕霉素提高自噬,HCT116细胞活性回升(P<0.05).结论 Rev-erb激动剂SR9009可以通过降低自噬来抑制结肠癌细胞系HCT116的增殖活性.