猪软骨细胞老化过程中Aggrecan的表达及其糖链分子结构的改变

摘要

本实验旨在探讨体外培养软骨细胞在老化过程中,aggrecan的表达水平与分子结构的变化及其间的相互关系.取体外培养P1～P5各代猪耳软骨细胞,RT-PCR检测aggrecan球间区域(interglobular domain, IGD)mRNA的表达状况;阿利新兰(Alcian Blue)法检测糖胺聚糖(glycosaminoglycan, GAG)的含量和糖链的分子结构.结果显示aggrecan IGD mRNA的表达在P4、P5细胞内明显降低(P＜0.05);GAG的合成也在P4、P5时显著减少(P＜0.05),但这2项指标的变化趋势之间无显著相关性.而长链/高度硫酸化的GAG由P4软骨细胞开始,绝对含量和相对含量均显著减少(P＜0.01),其与aggrecan IGD mRNA的变化趋势有显著相关性(P＜0.01) .由此可见,体外培养软骨细胞中aggrecan的表达合成和细胞老化有密切关系.aggrecan IGD mRNA的表达降低与aggrecan中长链/高度硫酸化GAG的合成代谢过程受阻可能是影响老化细胞成软骨能力的重要因素之一.