人源受体相关蛋白的原核表达及功能检测

摘要

目的 研究人源受体相关蛋白(RAP)的表达并鉴定表达产物的功能.方法 用IPTG诱导培养含有人源RAP重组表达载体(pET-28a(+)-RAP)的BL21转化菌,利用融合蛋白中6个组氨酸纯化标签,经Ni+-NTA树脂亲和层析、SDS-PAGE分离鉴定表达产物,并经脱盐、浓缩、冻干处理获得RAP融合蛋白冻干品.将RAP融合蛋白与富含LDLR家族受体的巨噬细胞进行结合实验,分析RAP融合蛋白的功能.结果 经亲和层析分离纯化后获得可溶性表达的RAP融合蛋白.实验显示,表达的RAP融合蛋白可竞争性抑制VLDL与巨噬细胞的结合.结论 实验获得的RAP融合蛋白具有正常的结合活性,可用于相关研究,为RAP蛋白生产开发奠定了良好的基础.