牛主动脉平滑肌细胞体外钙型的制备

摘要

目的 利用β-甘油磷酸盐处理牛主动脉平滑肌细胞(BASMC)制备体外血管钙化模型.方法 移植块法原代培养牛主动脉中膜平滑肌细胞,8代内的传代细胞添加10 mmol/L β-甘油磷酸盐培养10 d,Von Kossa染色、茜素红S 染色和电镜检查鉴定钙化,同时测量细胞层钙沉积、碱性磷酸酶活性及培养上清的骨钙素含量.结果 10 d后细胞层出现大量钙盐沉积,并且β-甘油磷酸盐时间依赖性增加钙沉积,碱性磷酸酶活性及骨钙素含量各时间点均较正常培养细胞显著增加(P＜0.01).结论 甘油磷酸盐能在短期内诱导出BASMC广泛钙化,用此方法制备的BASMC是一种良好的研究血管钙化的体外模型.