三氧化二砷抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖并促进细胞凋亡

摘要

目的研究三氧化二砷(As2O3)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)的抑制增殖、促进凋亡及诱导细胞周期停滞的作用.方法经组织块贴壁法原代培养的大鼠VSMCs,应用MTT法、台盼蓝拒染法、3H-胸腺嘧啶胞苷掺入法测定VSMCs的细胞活力、生长及增殖;应用流式细胞仪、DNA梯带法分析细胞周期分布及凋亡;应用Western blot法检测凋亡相关基因产物P53及细胞周期蛋白激酶抑制蛋白P21waf1/cip1.结果1～16 μmol/L As2O3对VSMCs细胞活力无明显影响,但可显著抑制细胞生长及DNA合成(P＜0.05),并呈时间和剂量依赖性.8 μmol/L As2 O3可使细胞周期S期减少(P＜0.05)、G0G1期增加(P＜0.05),并出现sub-G1期凋亡峰.16 μmol/L As2O3对VSMCs作用不同时间后出现典型的凋亡梯带样DNA片段.8 μmol/L As2O3可显著上调VSMCs的P53及P21waf1/cip1蛋白产物(P＜0.05),且呈时间依赖性.结论As2O3对VSMCs具有明确的抗增殖、促凋亡、阻滞细胞周期进程的作用,并且与P53、P21waf1/cip1表达上调密切相关.