小鼠胚胎干细胞体外诱导分化为胰岛素分泌细胞

摘要

目的 建立小鼠胚胎干细胞(mESCs)分化为胰岛素分泌细胞的体外诱导体系.方法 mESCs经拟胚体(EB)阶段,筛选出nestin阳性细胞,扩增培养后,用不同浓度烟碱对nestin阳性细胞进行诱导,观察诱导细胞的形态变化,并进行免疫组化染色、流式细胞仪分析和胰岛素分泌实验.结果 不同大小EB中nestin阳性细胞比例不同,直径为100 μm大小EB中较多.nestin阳性细胞经烟碱诱导15 d后,可形成分泌胰岛素的胰岛样细胞团,大部分细胞团胰岛素抗体检测为阳性.以10 mmol/L烟碱诱导分化后得到的胰岛素分泌细胞较0 mmol/L和5 mmol/L多,这些细胞在不同浓度葡萄糖刺激下能分泌不同量胰岛素.结论 10 mmol/L烟碱诱导小鼠ESCs 15 d,可获得较多胰岛素分泌细胞.