沉默PARG基因增强局部对结肠癌的免疫应答

摘要

目的 探讨沉默结肠癌PARG基因后对肿瘤局部免疫状态的影响.方法 以PARG-shRNA慢病毒载体转染CT26细胞为实验组,未转染CT26细胞和空载体转染CT26细胞为对照组,分别将各组细胞在BALB/C小鼠脾包膜下接种形成肝转移模型;Western blot法检测脾脏移植瘤中PARG蛋白的表达;免疫荧光双标法检测脾脏中B220+DEC205+ DC和CD11c+ CD11b+ DC,用激光共聚焦显微镜观察上述细胞;免疫荧光单标记法检测脾脏中CD4+T细胞及CD8+T细胞,用激光共聚焦显微镜观察上述细胞;ELISA法检测各组小鼠血清中IL-10和IL-12的表达.结果 PARG基因沉默后,脾脏移植瘤中PARG蛋白的表达量明显较对照组降低(P＜0.05);脾脏组织中B220+ DEC205+DC较对照组显著减少;而CD11c+ CD11b+ DC较对照组明显增多(P＜0.05);脾脏组织中的CD4+T细胞及CD4+/CD8+比值较对照组明显升高(P＜0.05);血清中IL-10的表达较对照组明显减少而IL-12的表达较对照组显著增多(P＜0.05).结论 沉默结肠癌PARG基因可通过影响DC及T细胞的增殖分化,增强肿瘤局部的免疫反应.