Vaspin对HUVECs中TNF-α介导的NF-κB和PI3K/Akt信号通路的影响

摘要

目的 探讨Vaspin对TNF-α介导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs) NF-κB和PI3K/Akt信号通路的影响.方法 体外分离并培养HUVECs.NF-κB荧光酶报告质粒瞬时转染HUVECs,用不同浓度(0～320 μg/L) Vaspin预培养,随后用10 μg/L的TNF-α作用于HUVECs,荧光酶报告分析法测定NF-κB的转录活性.Western blot测定磷酸化的Akt水平.ELISA测定细胞上清液中IL-1及IL-6的浓度.Real-time PCR、Western blot检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的mRNA和蛋白表达水平.结果 在HUVECs中,Vaspin抑制TNF-α介导的NF-κB转录活性(P＜0.05),并且NF-κB下游因子IL-1、IL-6、ICAM-1、VCAM-1和MCP-1的表达降低(P＜0.05).Vaspin增加了炎性因子TNF-α介导的磷酸化的Akt水平(P＜0.05).结论 Vaspin抑制HUVECs中TNF-α介导的NF-κB信号通路,增强TNF-α介导的PI3K/Akt信号通路的传导.