miR-126基因敲减对小鼠胸腺淋巴细胞发育的影响

摘要

目的 研究miR-126基因敲减对小鼠胸腺细胞发育的影响,并初步探讨其意义.方法 观察miR-126基因敲减(KD)小鼠胸腺的体积、重量和细胞总数;Real-time PCR检测小鼠胸腺miR-126表达水平;HE染色观察小鼠胸腺形态学结构;FACS检测胸腺中淋巴细胞比例、核抗原Ki-67的表达以及细胞凋亡的变化;最后,Western blot检测胸腺中磷酸化AKT(p-AKT)和磷酸化ERK1/2 (p-ERK)的表达.结果 WT和miR-126KD小鼠胸腺体积大小、重量以及细胞总数均无明显差异,但miR-126KD小鼠胸腺miRNA-126表达水平显著下调(P＜0.05).miR-126KD小鼠胸腺组织结构出现形态学异常.与WT小鼠相比,miR-126KD小鼠胸腺CD4+ SP细胞比例及细胞绝对数明显增加(P＜0.05),而CD4+ CD8+ (DP)细胞比例及绝对数则显著减少(P＜0.05),miR-126KD小鼠胸腺CD4+ SP细胞核抗原Ki-67表达显著增加(P＜0.05),且细胞凋亡明显减少(P＜0.05),而DP细胞Ki-67表达则明显减少(P＜0.05).最后,miR-126 KD小鼠胸腺淋巴细胞中磷酸化AKT和磷酸化ERK1/2的表达水平明显下调(P＜0.05).结论 miR-126基因敲减可显著影响胸腺细胞特别是CD4+ SP细胞的发育,为后续进一步深入探讨miR-126对T淋巴细胞发育以及功能的影响提供重要的实验基础.