丙烯腈诱导的氧化应激对大鼠睾丸NF-κB信号通路的影响

摘要

为探索丙烯腈(acrylonitrile,ACN)诱导的氧化应激对大鼠睾丸NF-κB信号通路的影响,将50只SPF级健康SD雄性大鼠按体重随机分为12.5、25、50 mg·kg-1 ACN染毒组,50 mg·kg-1 ACN+300 mg·kg-1 N-乙酰半胱氨酸(N-acetyleysteine,NAC)干预组(NAC干预组),对照组(给予等体积玉米油),每组10只,灌胃,1次/天,6天/周,共90 d.可见光分光光度法检测睾丸组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽比值(glutathione/oxidized glutathione,GSH/GSSG)、丙二醛(malondialdehyde,MDA).免疫荧光染色法检测睾丸核因子-κB(nuclear factor κB,NF-κB)激活及核转移.Western Blot检测睾丸p65、IκB蛋白表达.结果显示,低、高剂量染毒组大鼠睾丸GSH/GSSG比值、GSH-Px酶活性与对照组比较降低(P,＜0.05).中、高剂量染毒组大鼠睾丸MDA含量与对照组比较升高(P,＜0.05).NAC干预组大鼠睾丸MDA含量与高ACN组比较降低(P＜0.05);NAC干预组大鼠睾丸GSH/GSSG比值与高ACN组比较升高(P＜0.05);免疫荧光结果显示,高ACN组大鼠睾丸NF-κB被激活,并转移入细胞核.NAC干预组与高ACN组比较p65蛋白表达及核转移显著减少.Western Blot结果显示,高剂量染毒组大鼠睾丸p65蛋白表达与对照组比较升高(P＜0.05),IκB蛋白表达与对照组比较降低(P＜0.05);NAC干预组大鼠睾丸p65蛋白表达与高ACN组比较降低,IκB蛋白表达与高ACN组比较升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结果表明丙烯腈引起的氧化应激激活了大鼠睾丸生殖细胞NF-κB信号通路.