丹酚酸A对脂多糖诱导人肾小球系膜细胞凋亡的作用机制研究

摘要

目的 探究丹酚酸A对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人肾小球系膜细胞凋亡的作用机制。方法 该研究起止时间为2018年5月至2019年5月。购买华拓生物生产的HGMC人肾小球系膜细胞,分为A组、B组、C组、D组、E组五组,A组细胞不添加任何药物,B组、C组、D组、E组细胞均加入10 mg/L LPS培养,1 h后C组、D组、E组分别加入低剂量丹酚酸A(10 mg/L)、中剂量丹酚酸A(20 mg/L)、高剂量丹酚酸A(40 mg/L)处理24 h后做后续试验。检测细胞增殖、凋亡、细胞周期分布以及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase,AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路指标表达量。结果 与A组相比,B组细胞凋亡率、G0/G1期细胞分布率降低,S期、G2/M期细胞分布率升高;与B组相比,C组、D组、E组G0/G1期细胞分布率、细胞凋亡率升高,S期、G2/M期细胞分布率降低;与C组相比,D组、E组细胞凋亡率、G0/G1期细胞分布率升高,S期、G2/M期细胞分布率降低(均P<0.05);与D组相比,E组细胞凋亡率(37.59±4.62)%、G0/G1期细胞分布率(86.95±11.62)%升高,S期、G2/M期细胞分布率分别为(10.23±1.03)%、(4.26±1.03)%降低(P<0.05)。与A组相比,B组、C组、D组、E组细胞增殖率、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、胱天蛋白酶-3(caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)表达量升高,B细胞淋巴瘤相关X蛋白(Bax)表达量降低(P<0.05);与B组相比,C组、D组、E组细胞增殖率、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、caspase-3、Bcl-2表达量降低,Bax表达量升高(P<0.05);与C组相比,D组、E组细胞增殖率、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、caspase-3、Bcl-2表达量降低,Bax表达量升高(P<0.05);与D组的(26.12±2.25)%、(0.49±0.28)、(0.87±0.45)、(0.59±0.25)、(0.88±0.12)、(1.25±0.20)、Bax表达量(0.87±0.12)相比,E组细胞12 h增殖率、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、caspase-3、Bcl-2表达量分别为(19.02±1.06)%、(0.25±0.11)、(0.32±0.15)、(0.25±0.12)、(0.54±0.12)、(0.42±0.22)降低,Bax表达量(1.59±0.22)升高(P<0.05)。结论 丹酚酸A可能经促进PI3K/AKT/mTOR信号通路失活调控caspase-3、Bcl-2、Bax凋亡相关蛋白,而发挥促进LPS诱导人肾小球系膜细胞凋亡,抑制增殖,阻滞细胞周期进程的作用。