慢病毒载体介导的长链非编码RNA Rpph1沉默对胆囊癌GBC-SD细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响

摘要

目的 研究长链非编码RNA(lncRNA)Rpph1对胆囊癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响和潜在机制.方法 以人胆囊上皮细胞HGBEC为对照,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测胆囊癌细胞系GBC-SD、SGC-996和NOZ中ln?cRNA Rpph1的表达.将GBC-SD细胞分为对照组、si-con组、si-lnc Rpph1组.蛋白质印迹法检测周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、Ki-67、剪切型胱天蛋白酶3(Cleaved caspase-3)、剪切型胱天蛋白酶9(Cleaved caspase-9)、β连环素(β-catenin)和c-Myc蛋白表达水平,细胞计数试剂盒(CCK-8)法和流式细胞术分别检测细胞增殖、细胞周期和凋亡率.结果 与对照相比,胆囊癌细胞系GBC-SD、SGC-996和NOZ组细胞中lncRNA Rpph1含量[(4.89±0.31)、(3.42±0.42)、(3.96±0.45)比(1.07±0.13)]显著升高(P<0.05);与si-con组比较,si-lnc Rpph1组GBC-SD细胞活力[(0.78±0.08)比(1.17±0.13)]降低,凋亡率[(12.89±1.96)％比(4.26±0.65)％]、G0～G1期细胞比例[(63.67±2.62)％比(52.57±1.32)％]升高,CDK2[(0.22±0.04)比(0.41±0.05)]、Ki-67[(0.31±0.04)比(0.62±0.04)]、β-catenin[(0.32±0.05)比(0.63±0.05)]和[c-Myc(0.21±0.04)比(0.41±0.06)]蛋白表达降低(P<0.05),Cleaved caspase-3[(0.44±0.05)比(0.14±0.04)]和Cleaved caspase-9[(0.54±0.05)比(0.17±0.03)]蛋白表达增加(P<0.05).结论 慢病毒载体沉默lncRNA Rpph1可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制胆囊癌GBC-SD细胞增殖,诱导细胞周期停滞和促进细胞凋亡.lncRNA Rpph1是胆囊癌的潜在分子靶点.