过氧化氢诱导人肝癌细胞BEL7402产生氧化应激细胞模型的建立

摘要

目的 研究过氧化氢(H2 O2)构建体外人肝癌细胞BEL7402氧化应激模型的最佳作用浓度及时间.方法 采用噻唑蓝(MTT)染色法检测以10、100和1000μmol/L的H2 O2处理0、2、4、6、8、10、12和24 h后BEL7402细胞的存活率;采用双氢罗丹明123(DHR123)探针法、单细胞凝胶电泳技术和分光光度法检测以100μmol/L H2O2处理BEL7402细胞4 h后线粒体活性氧(ROS)含量、DNA损伤、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性.结果100μmol/L H2O2处理BEL7402细胞4 h后,其存活率为(43.44±5.74)％,与10μmol/L H2O2处理组(92.77±5.51)％相比,细胞存活率降低,差异有统计学意义(P<0.01);ROS含量结果显示100μmol/L H2O2处理BEL7402细胞40 min时其体内的ROS含量达到峰值,之后呈下降趋势;与健康对照组比较,100μmol/L H2O2组OTM值升高(P<0.05),MDA含量升高,差异有统计学意义(P<0.01),SOD和GSH-Px活性均下降(P<0.05或P<0.01).结论 100μmol/L H2O2、预处理4 h,可成功构建BEL7402细胞体外氧化应激模型,可为通过氧化应激机制抗肝病新药的研发奠定基础.