反相高效液相色谱法测定鼠胆汁中游离与结合型胆汁酸

摘要

建立了一种柱前衍生反相高效液相色谱荧光检测大鼠胆汁中游离与结合型胆汁酸的方法.以4-溴甲基-7-甲氧基香豆素为衍生剂,月桂酸为内标,Waters Nova C18色谱柱分离,采用甲醇/乙腈和水梯度洗脱,荧光激发波长(λex)330 nm,发射波长(λem)400 nm,内标标准曲线法定量.各胆汁酸在5～2 400 μmol/L范围内线性良好,r为0.998 9～0.999 7.最低检出限为1.2～2.5 μmol/L.精密度日内在1.05%～3.67%之间,日间在3.16%～6.83%之间.平均回收率为87.8%～106.7%.该方法灵敏、重复性好,分析时间短,线性范围宽,适合于科研工作中对鼠胆汁中各胆汁酸进行定量检测.